Флуигентен ODROPSEQFPCK Двонасочен микрофлуиден сензор за проток

Спецификации на производот

• Име на производ: DropSeq Fluidic
• Број на дел: ОДРОПСЕКФПК
• Верзија: Октомври 20 година

Информации за производот

Протоколот DropSeq Fluidic има за цел да објасни како да се реплицира флуидниот дел од протоколот Macosco DropSeq користејќи контролери на притисок Fluigent наместо шприц пумпи. НапредокотtagЕдна од карактеристиките на контролерите на притисок е нивното брзо време на одговор, што овозможува брзо генерирање на капки. Контролата на притисокот овозможува да се создадат капки со вистинска големина за помалку од две секунди. Дополнително, сензорите за проток овозможуваат директна контрола на протокот, имитирајќи ја работата на шприц пумпа.

Материјали и методи:
За да го имплементирате овој протокол, ќе ви бидат потребни следниве материјали:

• Пакет DropSeq
• Надворешен производ (опционално)
• Различни компоненти како што се наведени во описот на содржината

Упатство за употреба на производот

Подготовка на уредот за нов експеримент:

1. Проверете ги PDMS уредите пред употреба.
2. Отстранете мал дел од фолијата што ги покрива генераторите.
3. Додадете капка dSURFan или алтернативен сурфактант во отворот и почекајте.
4. Поврзете ја цевката со микрофлуидниот уред.
5. Применете мал притисок користејќи Flow-EZ.
6. Почекајте течноста да излезе од влезовите/излезите и вратете го притисокот на 0 mbar.
7. Вклучете ги вортекс мешалките и притискајте ги резервоарите додека не почне да излегува течноста.
8. Поврзете ги сите цевки според шемата.

Започнување на експеримент:
По правилно поврзување, започнете со работа на DropSeq со примена на притисок врз различни резервоари користејќи го софтверот AiO. Капките треба да се формираат за неколку секунди.

Контрола на проток:
Со единица за проток, користете го Flow-EZ како шприц пумпа. Софтверот AiO дозволува команди за брзина на проток, прилагодувајќи го притисокот соодветно. Зачувајте ја конфигурацијата на притисокот откако ќе ја поставите.

ЦЕЛ НА ПРОТОКОЛОТ

• Овој протокол има за цел да објасни како да се репродуцира флуидниот дел од протоколот Macosco DropSeq користејќи контролери на притисок Fluigent наместо шприц-пумпи.
• Главниот напредокtagЕдна од предностите на контролерите на притисок е многу брзото време на одговор. Користејќи контрола на притисок, капки со соодветна големина можат да се генерираат за помалку од две секунди. Користејќи сензори за проток, исто така е можно да се користи директна контрола на проток за да се користи контролерот на притисок на ист начин како што би користеле шприц пумпа.

МАТЕРИЈАЛИ И МЕТОДИ

За да го реализирате овој протокол, потребни ви се следниве материјали:

Опис на содржината за референца на производот
Пакет DropSeq	ОДРОПСЕКФПК	3 *FlowEZ 2 бари
		1 * Врска
		1 *Капа 15 мл
		2 *Капче 2мл
		2 *Проточна единица М
		1 *Проточна единица L
		DropSeq PDMS чип кој содржи 23 дизајни
		Комплет за снабдување со проток EZ
		2* Комплет за низок проток
		Комплет со висока стапка на проток
		Комплет за поврзување и цевки DropSeq
Изборен производ	IMCA001	Дигитален микроскоп со голема брзина
	ДР-РЕ-СУ-12	12 ml dSURF
	FLPG+	Извор на притисок
Надворешен производ	Баркодирани монистра	Баркодирани монистра: Chemgenes CSO-2011*
	Вител миксер	Вортекс миксер: Сигма, Фишер Саентифик…

Првиот чекор е да се рекреира следната поставка.

ПРОТОКОЛ

Подготовка на уредот за нов експеримент
Кога започнувате нов експеримент, се препорачува да го истиснете целиот воздух од чипот и цевките. За таа цел, следете ги следниве чекори:

1. Пред да ги користите PDMS уредите, внимателно проверете ги генераторите. Доколку имате какви било забелешки/прашања, слободно контактирајте не.
2. Не ја лупете целосно фолијата на почетокот: Ве молиме отсечете ја малата површина за секој генератор за употреба. (Сите наши PDMS чипови се покриени со фолија за запечатување, хидрофобен порозен фолија за запечатување со лепило од медицински квалитет за плочи за ткивни култури.)
3. Додадете една капка dSURF (или флуорирано масло со друг сурфактант ако не го користите dSURF) во излезот пред да го започнете експериментот и почекајте неколку минути. Ве молиме зголемете ги стапките на проток на F-маслената и водената фаза чекор по чекор. Избегнувајте директно скокање од 0 на ~14 mL/h (или максимални стапки на проток).
4. Поврзете ја цевката dSURF (или флуорирано масло со друг сурфактант ако не го користите dSURF) со десниот влезен отвор на микрофлуидниот уред.
5. Применете мал притисок користејќи го Flow-EZ (околу 200 mbar би требало да биде доволно)
6. Почекајте додека не видите масло како излегува од отворените влезови/излези на чипот, а потоа вратете го притисокот на 0 mbar.
7. Вклучете ги вортекс мешалките и применете мал притисок врз другите два резервоара додека не видите мала капка течност што излегува од крајот на цевката.
8. Запрете ги сите притисоци и поврзете ги сите цевки според шемата

Лансирање на експеримент
Откако уредот ќе се поврзе правилно, започнувањето на работата на DropSeq е многу брзо. Едноставно нанесете ги следниве притисоци на различните резервоари користејќи го софтверот AiO. Капките треба да се појават за помалку од неколку секунди.

• P (Масло) = 1300 мбар
• P (клетки) = 540 мбар
• P (Монистра) = 580 мбар
  Овие притисоци треба да генерираат капки од околу 90-130 µm, што доведува до стапки на енкапсулација од 1 до 3).
  Совет:
  Користејќи го софтверот AiO, конфигурациите на притисокот лесно можат да се зачуваат. Ова овозможува поставување на сите притисоци на дадена точка истовремено.

Контрола на проток

• Во комбинација со единица за проток, Flow-EZ може да се користи точно како шприц пумпа. Софтверот AiO овозможува команди за проток. Повратна јамка на протокот потоа ги прилагодува притисоците на вистинската вредност. Оваа техника може да биде корисна за проценка на потребните притисоци за експериментот.
• Откако ќе се доведе во правилна состојба, конфигурацијата на притисокот може да се зачува.

  

За дополнителни информации, контактирајте не преку е-пошта: contact@fluigent.com или консултирајте се со нашиот webсајт: www.fluigent.com.

Најчесто поставувани прашања

Колку брзо можат да се генерираат капки со употреба на контролери на притисок?

Капки со соодветна големина можат да се генерираат за помалку од две секунди со помош на контролери на притисок.

Може ли да користам директна контрола на проток со овој протокол?

Да, сензорите за проток овозможуваат директна контрола на протокот слично на користењето шприц пумпа.

Документи / ресурси

Флуигентен ODROPSEQFPCK Двонасочен микрофлуиден сензор за проток [pdf] Упатство за употреба ODROPSEQFPCK, IMCA001, DR-RE-SU-12, ODROPSEQFPCK Двонасочен микрофлуиден сензор за проток, ODROPSEQFPCK, Двонасочен микрофлуиден сензор за проток, микрофлуиден сензор за проток, Сензор за проток

Референци

• Упатство за употреба